为什么我DNA跑琼脂糖凝胶电泳时跑不出孔
来源:学生作业帮 编辑:灵鹊做题网作业帮 分类:英语作业 时间:2024/04/29 23:32:46
为什么我DNA跑琼脂糖凝胶电泳时跑不出孔
我们用PCR扩增出来的DNA分子,在跑琼脂糖凝胶电泳回收时居然跑不出孔 但是有条带,不知道是什么原因,另外说明一下,不是琼脂糖凝胶电泳的问题,因为我点了几次,而且其他的都能跑出很好的条带(不是一批上的PCR反应),而就这一批上的没跑不出电泳,请专业人士分析一下我是不是加错了什么东西让DNA分子不带电.(我加的东西:buffer,dNTP,引物,酶,ddH2O,TE)加的东西也没问题天天用引物也没问题.
我扩的pcr一般在几百bp 不可能跑不出去或者太大 我用的3000marker作对照,而且另一批跑出去了.就算我没有扩对目的基因,也会有不对的带啊 但它在胶空那儿有很亮的带
我们用PCR扩增出来的DNA分子,在跑琼脂糖凝胶电泳回收时居然跑不出孔 但是有条带,不知道是什么原因,另外说明一下,不是琼脂糖凝胶电泳的问题,因为我点了几次,而且其他的都能跑出很好的条带(不是一批上的PCR反应),而就这一批上的没跑不出电泳,请专业人士分析一下我是不是加错了什么东西让DNA分子不带电.(我加的东西:buffer,dNTP,引物,酶,ddH2O,TE)加的东西也没问题天天用引物也没问题.
我扩的pcr一般在几百bp 不可能跑不出去或者太大 我用的3000marker作对照,而且另一批跑出去了.就算我没有扩对目的基因,也会有不对的带啊 但它在胶空那儿有很亮的带
1. try low your agarose concentration, say, to 0.8%.
2. heat your PCR mix at 60C for 5 minutes before loading it.
3. when you run your gel, include one PCR without primers as control. In that way you will see whether it is the same as your testing PCR. If it is the same, that may indicate your PCR is not good.
Good luck.
2. heat your PCR mix at 60C for 5 minutes before loading it.
3. when you run your gel, include one PCR without primers as control. In that way you will see whether it is the same as your testing PCR. If it is the same, that may indicate your PCR is not good.
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