请问想问下在以cDNA为模板时,PCR的结果却是徒步 什么原因
来源:学生作业帮 编辑:灵鹊做题网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/06/13 01:16:03
请问想问下在以cDNA为模板时,PCR的结果却是徒步 什么原因
我的模板质粒非常异常,超螺旋的部分亮度太亮了.引物有一个也是用了好久的.
我最近做拼接PCR也是弥散带,把所有的东西都换了一遍,锁定引物和模版.我的模板质粒非常异常,超螺旋的部分亮度太亮了.引物有一个也是用了好久的.
我最近做拼接PCR也是弥散带,把所有的东西都换了一遍,锁定引物和模版.我的模板质粒非常异常,超螺旋的部分亮度太亮了.引物有一个也是用了好久的.
我以前P侧翼序列时.经常P出弥散带,就是真实PCR的反映.结果优化后能P出单一条带也是单引物自扩结果.
如果你一定要优化条件,可以用TOUCH DOWN.就是退火逐步降低.我的经验是能筛到单一条带.但不保证是你要的目的条带.churchill87426(站内联系TA)LZ 的目的条带多长啊?其实内标很好并不能说明cDNA好啊,我这段时间做的用国产试剂盒反转录就能出actin但是目的条带不出(目的条带2100bp),后来换个进口反转录试剂盒,一次目的条带就出了,当然actin也出.不知道LZ最后P出来目的条带没啊?
我最近做拼接PCR也是弥散带,把所有的东西都换了一遍,锁定引物和模版.我的模板质粒非常异常,超螺旋的部分亮度太亮了.引物有一个也是用了好久的.
我最近做拼接PCR也是弥散带,把所有的东西都换了一遍,锁定引物和模版.我的模板质粒非常异常,超螺旋的部分亮度太亮了.引物有一个也是用了好久的.
我以前P侧翼序列时.经常P出弥散带,就是真实PCR的反映.结果优化后能P出单一条带也是单引物自扩结果.
如果你一定要优化条件,可以用TOUCH DOWN.就是退火逐步降低.我的经验是能筛到单一条带.但不保证是你要的目的条带.churchill87426(站内联系TA)LZ 的目的条带多长啊?其实内标很好并不能说明cDNA好啊,我这段时间做的用国产试剂盒反转录就能出actin但是目的条带不出(目的条带2100bp),后来换个进口反转录试剂盒,一次目的条带就出了,当然actin也出.不知道LZ最后P出来目的条带没啊?
请问想问下在以cDNA为模板时,PCR的结果却是徒步 什么原因
用基因组DNA做模板进行PCR扩增,设计引物所选序列也用cDNA为模板有什么不同
基因克隆实验克隆实验问题 1、以cDNA为模板做PCR反应,得到的产物和预期的长度一样.2、再用pMD-19载体连接目的
请问,我反转录时设置了2个循环,cdna还可以做半定量PCR吗?Actin的pcr在500bp单一条带.
2012新课标卷第40(4)反转录作用的模板是MRNA,产物是CDNA.若要在体外获得大量反转录产物,常采用PCR技术.
引物设计问题,以mRNA序列设计引物,然后用cDNA为模板来扩增,在设计引物时mRNA序列是否要反转序列?
以DNA为模板扩增序列,连接,转化,测序时跟用cDNA做模板一样吗?
real-time PCR可以直接以细菌的DNA为模板进行定量分析吗?还是real-time PCR 是针对RNA的啊?
PCR实验中加cDNA模板量是否要一致?
请教下用cDNA作为模板跑PCR相关经验?
Rt-pcr EB 染色cDNA是什么原因使其在染色后的不到cDNA条带
请问在PCR实验中,如果不知道模板DNA的核酸序列的情况下如何设计PCR引物?