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请问想问下在以cDNA为模板时,PCR的结果却是徒步 什么原因

来源:学生作业帮 编辑:灵鹊做题网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/06/13 01:16:03
请问想问下在以cDNA为模板时,PCR的结果却是徒步 什么原因
请问想问下在以cDNA为模板时,PCR的结果却是徒步 什么原因
我的模板质粒非常异常,超螺旋的部分亮度太亮了.引物有一个也是用了好久的.
我最近做拼接PCR也是弥散带,把所有的东西都换了一遍,锁定引物和模版.我的模板质粒非常异常,超螺旋的部分亮度太亮了.引物有一个也是用了好久的.
我最近做拼接PCR也是弥散带,把所有的东西都换了一遍,锁定引物和模版.我的模板质粒非常异常,超螺旋的部分亮度太亮了.引物有一个也是用了好久的.
我以前P侧翼序列时.经常P出弥散带,就是真实PCR的反映.结果优化后能P出单一条带也是单引物自扩结果.
如果你一定要优化条件,可以用TOUCH DOWN.就是退火逐步降低.我的经验是能筛到单一条带.但不保证是你要的目的条带.churchill87426(站内联系TA)LZ 的目的条带多长啊?其实内标很好并不能说明cDNA好啊,我这段时间做的用国产试剂盒反转录就能出actin但是目的条带不出(目的条带2100bp),后来换个进口反转录试剂盒,一次目的条带就出了,当然actin也出.不知道LZ最后P出来目的条带没啊?