灵鹊做题网蛋白质三大分离技术的根本原理是什么?
来源：学生作业帮 编辑：灵鹊做题网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/04/27 15:52:39
蛋白质三大分离技术的根本原理是什么?
如题.哪三大分离技术,原理是什么
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蛋白质分离技术
双向聚丙烯酰胺凝胶电泳（two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis,2-DE）是使用最广泛的蛋白质分离技术,其原理是根据蛋白质的等电点和分子量的差异使之在二维平面上分开.目前,最多可分离到11000个左右蛋白样点.
另一种蛋白质分离技术是毛细管电泳（CE）,其中应用较为广泛的是毛细管区带电泳（依据不同蛋白质的电荷质量比的差异实现分离）、毛细管等电聚焦（依据蛋白质等电点不同在毛细管内形成pH梯度而实现分离）和毛细管电色谱（毛细管电泳和液相色谱的融合技术）.CE具有灵敏度高、稳定性好、分离自动化和成本消耗少等优点.
二维色谱技术：二维色谱分离蛋白质有多种组合模式,第一维色谱多为离子交换色谱,也有凝胶过滤色谱,第二维通常是反向色谱,反向色谱采用反向有机溶剂作流动向,从而避免了盐等添加剂对后续质谱分析的影响.这种技术最大优势是可以避开相对分子质量和等电点的限制.作为一种新的技术,它的主要问题是分辨率和重现性尚不能与二维凝胶电泳相比.
用于蛋白质组分离的技术还有二维层析、荧光差异显示双向电泳、二维液相分离和同位素亲和标签等.
双向聚丙烯酰胺凝胶电泳（two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis,2-DE）是使用最广泛的蛋白质分离技术,其原理是根据蛋白质的等电点和分子量的差异使之在二维平面上分开.目前,最多可分离到11000个左右蛋白样点.
另一种蛋白质分离技术是毛细管电泳（CE）,其中应用较为广泛的是毛细管区带电泳（依据不同蛋白质的电荷质量比的差异实现分离）、毛细管等电聚焦（依据蛋白质等电点不同在毛细管内形成pH梯度而实现分离）和毛细管电色谱（毛细管电泳和液相色谱的融合技术）.CE具有灵敏度高、稳定性好、分离自动化和成本消耗少等优点.
二维色谱技术：二维色谱分离蛋白质有多种组合模式,第一维色谱多为离子交换色谱,也有凝胶过滤色谱,第二维通常是反向色谱,反向色谱采用反向有机溶剂作流动向,从而避免了盐等添加剂对后续质谱分析的影响.这种技术最大优势是可以避开相对分子质量和等电点的限制.作为一种新的技术,它的主要问题是分辨率和重现性尚不能与二维凝胶电泳相比.
用于蛋白质组分离的技术还有二维层析、荧光差异显示双向电泳、二维液相分离和同位素亲和标签等.