灵鹊做题网如何提细胞的组蛋白做western blot?
来源：学生作业帮 编辑：灵鹊做题网作业帮 分类：语文作业 时间：2024/06/16 04:42:10
如何提细胞的组蛋白做western blot?
目前在做western blot 不清楚怎么提细胞中的组蛋白怎么提,是用特殊的细胞裂解液吗?还是可以直接用核蛋白提取试剂盒呢?麻烦高手帮帮小弟.
目前在做western blot 不清楚怎么提细胞中的组蛋白怎么提,是用特殊的细胞裂解液吗?还是可以直接用核蛋白提取试剂盒呢?麻烦高手帮帮小弟.
你的意思就是提取核蛋白,提取核蛋白和提取全蛋白用的裂解液是不一样的.一般情况下我们都是买试剂盒,里面包含有细胞裂解液和核裂解液,按照说明书实用就行了.
1 20mmol/L的Hepe（PH 7.9）
2 420mmol/L NaCl
3 1.5mmol/L MgCl2
4 2%Igepal
5 0.5mmo/L EDTA
6 20%甘油
7 1mmol/L DTT
8 0.25mmol/L PMSF
9 5ug/ml Aprotinin
10 5ug/ml Pepstatin
11 5ug/ml Leupeptin
或者你可以按照这个配,这个是细胞核裂解液.
做法就是,你按顺序提了全蛋白以后把上清弃掉,在沉淀中加入这个核裂解液,震荡然后离心,此时上清就是核蛋白了.
1 20mmol/L的Hepe（PH 7.9）
2 420mmol/L NaCl
3 1.5mmol/L MgCl2
4 2%Igepal
5 0.5mmo/L EDTA
6 20%甘油
7 1mmol/L DTT
8 0.25mmol/L PMSF
9 5ug/ml Aprotinin
10 5ug/ml Pepstatin
11 5ug/ml Leupeptin
或者你可以按照这个配,这个是细胞核裂解液.
做法就是,你按顺序提了全蛋白以后把上清弃掉,在沉淀中加入这个核裂解液,震荡然后离心,此时上清就是核蛋白了.
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