灵鹊做题网大肠杆菌感受态制备为什么要冰上操作,0-4℃操作.还有,为什么要采用对数生长期的菌?
来源：学生作业帮 编辑：灵鹊做题网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/04/29 23:01:26
大肠杆菌感受态制备为什么要冰上操作,0-4℃操作.还有,为什么要采用对数生长期的菌?
不要只给一个简简单单的回答说转化率高,要具体、详细点的,最好有原理,
不要只给一个简简单单的回答说转化率高,要具体、详细点的,最好有原理,
这问题要详细讲起来牵涉到很多其他概念,不知道你的基础如何,我试着归纳一下主要原因吧
先回答第二个问题,用对数期细菌因为对数期细胞生长旺盛,新生细胞壁薄,细胞膜通透性好,外源DNA容易进入,同时意味着各种DNA复制所需的酶在细胞内全数到位,当外源DNA进入后有现成材料可以利用,迅速展开复制,重组等一系列过程,大白话就是这种情况下,外源DNA更容易站稳脚跟,从而转化率也较高.
第一个问题,细菌处于0℃,CaCl2 的低渗溶液中,菌细胞会膨胀成球形,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面（因为DNase会消化外源DNA,如形成抗DNase的物质有利外源DNA的生存）,从低温突然提高到42℃短时间热刺激,应激反应下可产生大量cAMP,而cAMP可改变细胞膜通透性,促使细胞吸收 DNA复合物,从而大大提高转化率.
以上是主要原因,不知你是否还有不明白的地方?
先回答第二个问题,用对数期细菌因为对数期细胞生长旺盛,新生细胞壁薄,细胞膜通透性好,外源DNA容易进入,同时意味着各种DNA复制所需的酶在细胞内全数到位,当外源DNA进入后有现成材料可以利用,迅速展开复制,重组等一系列过程,大白话就是这种情况下,外源DNA更容易站稳脚跟,从而转化率也较高.
第一个问题,细菌处于0℃,CaCl2 的低渗溶液中,菌细胞会膨胀成球形,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面（因为DNase会消化外源DNA,如形成抗DNase的物质有利外源DNA的生存）,从低温突然提高到42℃短时间热刺激,应激反应下可产生大量cAMP,而cAMP可改变细胞膜通透性,促使细胞吸收 DNA复合物,从而大大提高转化率.
以上是主要原因,不知你是否还有不明白的地方?
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