反转录cDNA第一链,进行PCR扩增,只有引物二聚体,这是为什么呢?
来源:学生作业帮 编辑:灵鹊做题网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/30 00:06:34
反转录cDNA第一链,进行PCR扩增,只有引物二聚体,这是为什么呢?
Oligo(dT)反转录,目的片段2700bp,引物二聚体小于100bp
Oligo(dT)反转录,目的片段2700bp,引物二聚体小于100bp
反转录失败或者RNA质量不好
再问: 有没有可能是引物的设计不好?(引物二聚体的范围是在100bp左右)如果是cDNA反转录不好,该如何检测呢?谢谢
再答: 有可能是引物的问题;在P目的基因的时候,建议你同时P个actin,如果actin有,而目的基因没有则很可能就是引物问题或退火温度有待于摸索;如果连actin都没P出来,则可能是反转录的问题或是RNA质量不好
再问: 你好,谢谢……我也想过这样做,但是我做的是鸭子的,鸭子的actin也只有150左右,无法分辨引物二聚体和actin,我想请问你一下,有没有大一些的管家基因,如何找到鸭子上其他的管家基因……
再答: 这样的话, 你只能从相关文献上找了,看看其它文献上都用的哪些管家基因。我没做过鸭子,所以帮不上忙了
再问: 有没有可能是引物的设计不好?(引物二聚体的范围是在100bp左右)如果是cDNA反转录不好,该如何检测呢?谢谢
再答: 有可能是引物的问题;在P目的基因的时候,建议你同时P个actin,如果actin有,而目的基因没有则很可能就是引物问题或退火温度有待于摸索;如果连actin都没P出来,则可能是反转录的问题或是RNA质量不好
再问: 你好,谢谢……我也想过这样做,但是我做的是鸭子的,鸭子的actin也只有150左右,无法分辨引物二聚体和actin,我想请问你一下,有没有大一些的管家基因,如何找到鸭子上其他的管家基因……
再答: 这样的话, 你只能从相关文献上找了,看看其它文献上都用的哪些管家基因。我没做过鸭子,所以帮不上忙了
反转录cDNA第一链,进行PCR扩增,只有引物二聚体,这是为什么呢?
反转录PCR引物如何设计?已经得到cDNA第一链,引物设计是以cdna为模版,设计上下游引物吗?
PCR扩增时为什么需要引物呢?
做逆转录PCR,扩增出的条带怎样区分是残留基因组DNA还是反转录得到的cDNA得到的结果
pcr 扩增产生大量引物二聚体的原因
我提取RNA,反转录得到cDNA,我要由此扩增功能基因,请问引物设计时,用查到的mRNA序列,还是用cDNA序列
mRNA反转录中使用olig(t)18做引物所得到的是单链cDNA吗?如果是的话如何才能得到双链的cDNA啊?
什么叫第一链 cDNA反转录试剂盒,反转录不就是从RNA到DNA么,不就一个链么,为什么叫第一链
在进行PCR实验扩增时如何设计引物?为什么要用引物?原理是什么?
PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带
这是引物二聚体吗?
做RNA反转录,合成cDNA第一链时,不加DTT可以吗?