用基因组DNA做荧光定量为什么起峰很杂乱?

来源：学生作业帮编辑：灵鹊做题网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/29 20:56:40

引物不特异或者温度太低
再问：我在质粒上做，峰图都很漂亮。引物BLAST也是很特异的，温度都设在58度，但是用基因组DNAP出来的峰就是杂乱无章，而且不管梯度稀释多少倍，峰图都没有显示出梯度来，崩溃了。求各位高手指点。我的目的是想通过荧光定量来检测算出转基因的拷贝数。谢谢！
再答： 1 那要重新检查一下你的质粒上的片段和基因组上的片段有没有差别。比如该片段是否含有Intron？是不是引物既能检测你转进去的cDNA，又能检测出内源基因的DNA？ 2 基因组模板为复杂模板，应该比P质粒时，预变性时间要长一点

用基因组DNA做荧光定量为什么起峰很杂乱? 荧光定量pcr做荧光定量pcr的绝对定量时为什么要构建标准质粒,利用质粒构建标准曲线,为什么不直接用DNA模板构建标准曲 HBV.DNA荧光定量 PCR荧光定量HBV DNA dna荧光定量pcr结果乙肝dna荧光pcr定量乙肝病毒DNA荧光定量PCR结果乙肝病毒DNA荧光定量PCR结果是1. 乙肝病毒dna荧光定量pcr结果是2. 荧光定量HBV-DNA怎么看? HBV-DNA荧光定量PCR检验报告乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR