大肠杆菌可以直接做PCR吗
来源:学生作业帮 编辑:灵鹊做题网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/06/04 05:38:49
大肠杆菌可以直接做PCR吗
农杆菌的菌液可以直接作为PCR的模板,请问大肠杆菌可以吗?就是说,可否省略从大肠杆菌提取质粒的步骤.
农杆菌的菌液可以直接作为PCR的模板,请问大肠杆菌可以吗?就是说,可否省略从大肠杆菌提取质粒的步骤.
不可以的,PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引 物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合 物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板.每完成一个循环需 4分钟,3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍.到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝.模板加热后一般的大肠杆菌都会被杀死
大肠杆菌可以直接做PCR吗
大肠杆菌菌液可以直接做PCR吗
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请问real time PCR的试剂盒可以在普通的PCR仪做普通的PCR吗?
胰蛋白胨大豆琼脂可以做大肠杆菌吗
如果外周血抗凝后直接-80℃保存而没有加Trizol裂解,还可以提取出RNA做PCR吗?
pcr产物不纯化直接酶切连接可以吗?PCR反应的buffer会不会对酶产生影响哦~
qPCR试剂盒可以做普通的PCR吗?
用real time pcr 引物可以做一般pcr
弱问:做实施定量PCR一定要提RNA来逆转录再做吗?为什么不能直接提DNA做?
real-time PCR可以直接以细菌的DNA为模板进行定量分析吗?还是real-time PCR 是针对RNA的啊?