western 抗体选择

来源：学生作业帮编辑：灵鹊做题网作业帮分类：生物作业时间：2024/05/05 22:18:57

western 抗体选择
请问做细菌的某基因的表达量,比如csgD,RT-PCR后,用western 验证,1.那我抗体的选择有什么要注意的吗?2.我要选CsgD这个蛋白的特异性一抗吗?如果没有怎么办?

因为是检测的特异蛋白的表达,当然要用特异的抗体.

你现在的问题是先找到抗体再考虑其他.建议先找到这个蛋白的ID号,利用这个ID号先搜搜有没有提供抗体的公司,可以到www.biocompare.com上去试试.那上面各家公司的抗体都能搜到.

看看文献上,有人做这个蛋白的WB么?要是有,写信去要点,这个是碰运气的方式,但是如果碰到恰好有人做,人家又比较nice的话,你的问题就解决了.不好的地方是,抗体量非常有限,用完了,很难启齿再要...

如果确认没有抗体,要么就表达这个蛋白,纯化以后,免疫动物,去做抗体.如果单位没有动物房,这个基本就没法操作了.表达蛋白,纯化的时会都会比较长,然后免疫动物也得几个月,所以应该是耗时最长的办法.

如果钱够,直接找抗体合成公司,根据蛋白序列,设计抗原（可能是肽段）后定制抗体.多抗的时间短些,单抗怎么也得要半年.好处是没有表达纯化的折磨,比自己做快点,公司一般的做得也还行,完全没经验找公司比较好.

如果实在没有抗体,还有一个办法,把样品弄出来去打质谱,不用抗体,但是可以把这个蛋白的序列弄进去,搞点标准品,或类似标准品,就可以定量了.

western 抗体选择请问western抗体用量请问用酿酒酵母做western blot试验,如何选择抗体呢? 6*his标签抗体做western难度怎么样如何选择western bolt PVDF膜请问做免疫组化的抗体和做Western blot的抗体有什么区别和联系 Western 用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时,能用目的蛋白本身的抗体进行检测,但用flag抗体确无法 western blot 中,前面跑胶加热蛋白变性了,为什么后面还能跟抗体特异性结合. 我的抗体做免疫组化的时候是即用型的,做western-blot时是否还需要稀释? 请问用Western blotting 检测培养细胞里面的基质金属蛋白酶2和9用什么抗体? western blot里面蛋白变性,那么这样的蛋白失去了活性,为什么还能和抗体蛋白结合?