在做载体构建的时候,PCR时有目的条带,但是摇菌酶切没有东西,请问是怎么回事啊?

在做载体构建的时候,PCR时有目的条带,但是摇菌酶切没有东西,请问是怎么回事啊? 我构建的穿梭载体,连接好后进行双酶切和PCR两个途径的检测,结果酶切没有条带显示,而PCR确有目的条带! 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? 我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带. 菌液pcr检测目的条带很明显但是有弱杂带是怎么回事 有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因? PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 PCR目的条带的问题, 我的PCR条带弥散,阴性对照也弥散,但是不加引物不弥散,当然也没有条带,请问都是什么原因啊? 构建载体的时候,先用设计好的引物PCR所要的目的基因,再和T载体连接,再转化,再小抽,再双酶切,再和 转化后菌液pcr有目的条带,然后提质粒和双酶切验证.但是没有得到目的条带.