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酵母转化效率低什么原因,如何改进,我用的试剂盒是CLONTECH的,培养基,试剂都是现成的.

来源:学生作业帮 编辑:灵鹊做题网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/12 09:54:54
酵母转化效率低什么原因,如何改进,我用的试剂盒是CLONTECH的,培养基,试剂都是现成的.
酵母转化效率低什么原因,如何改进,我用的试剂盒是CLONTECH的,培养基,试剂都是现成的.
我没用过试剂盒,据我得经验,首先酵母得OD在1.0以内,因为酵母老了以后很难破壁,其次我一直用的都是酶法破壁,一般是加lysing enzyme消化15min,你那个试剂盒应该没大差别,另外你应该转化得是质粒吧,最好是超螺旋DNA,而且要1ug以上.
我不知道你之前做过这个没有,酵母的转化效率比E.coli还是要低很多得,你可以扩大菌量和DNA试试(保证转化方法和试剂都没问题)