灵鹊做题网关于转基因植株检测的问题
来源：学生作业帮 编辑：灵鹊做题网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/17 21:22:35
关于转基因植株检测的问题
我做的是大豆转基因，最近做检测，用328bp的引物做PCR时质粒很正常，可是基因组在328bp左右没有出现条带，而在700bp出现很亮的条带；用35S引物PCR，在目的条带那出现了条带，但是每次条带都比较多，大概60%左右都有，阳性率不可能那么高的吧，就像用基因组做个酶切验证，我想问，基因组的酶切和质粒的酶切有什么区别没有？做实验的过程中需要注意点什么呢？
第一次做酶切，之前没做过，麻烦您多给我介绍下，
我做的是大豆转基因，最近做检测，用328bp的引物做PCR时质粒很正常，可是基因组在328bp左右没有出现条带，而在700bp出现很亮的条带；用35S引物PCR，在目的条带那出现了条带，但是每次条带都比较多，大概60%左右都有，阳性率不可能那么高的吧，就像用基因组做个酶切验证，我想问，基因组的酶切和质粒的酶切有什么区别没有？做实验的过程中需要注意点什么呢？
第一次做酶切，之前没做过，麻烦您多给我介绍下，
1 从基因组PCR时你的引物的Tm要比较高（>60℃）才能获得比较好的特异性条带.你可以加长你的引物试试.
2 抗性筛选后能生长的苗一般都是插入个体,如果你是抗性筛选后的苗,60%的阳性率是正常的.
3 基因组酶切是没用的...除非你要做southern.
2 抗性筛选后能生长的苗一般都是插入个体,如果你是抗性筛选后的苗,60%的阳性率是正常的.
3 基因组酶切是没用的...除非你要做southern.