overlap引物设计要多少重叠碱基才合适

来源：学生作业帮编辑：灵鹊做题网作业帮分类：综合作业时间：2024/05/06 22:49:28

overlap引物设计要多少重叠碱基才合适
在下小白一只,现在要将一个78bp、1100bp、141bp 3个片段融合起来,最大的片段1100bp在中间.片段之间的引物需要重叠碱基多少个才合适?还想请问,比方说1片段的1b引物和2片段有重叠碱基,那么1b引物中用于与2片段重叠碱基的个数和作为1片段的引物的碱基个数比例大概是多少才合适?

个人经验是16个以上,为了保险最好超过20个重叠.
同时注意重叠的部分最好不要有dimer或者hairpin.

我在做overlap PCR,两个片段一条736bp,一条255bp,20个重叠碱基,四个引物的TM值都是59度,两条都设计引物扩增模板基因,引物中至少要有多少个碱基与模板配对?16个可以吗半定量RT-PCR设计引物时产物长度为多少合适谁可以简单罗列下做OVERLAP PCR的要点吗?最好图解原理以及引物设计时候注意事项 PCR引物设计中,引物上是否需要每个碱基都与模板链结合? 荧光定量pcr引物有多少引物二聚体合适... 为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀? 设计的引物19个碱基,其中包括6 bp的酶切位点和3个保护碱基,和模板配对的只有11个碱基,是不是太短? 2011年江苏高考卷的最后一题,他问一个同学设计了一对引物,该引物不合理是因为引物I和引物II局部发生碱基互补配对而失效 PCR扩增目标基因,完全没有条带.是不是设计的引物太短?引物只有10个碱基和模板配对如何在pubmed上检索mRNA序列及设计合适的PCR引物? 拍产品图,要用在彩盒设计上面的,拍照时灯光的灯泡要多少瓦的才合适?