本人新手,连接产物转化时,流程上都是说200微升感受态细胞10微升连接产物,能不能用5微升连接产物与100微升感受态细胞

来源：学生作业帮编辑：灵鹊做题网作业帮分类：综合作业时间：2024/04/28 12:53:04

本人新手,连接产物转化时,流程上都是说200微升感受态细胞10微升连接产物,能不能用5微升连接产物与100微升感受态细胞混合,效果怎么样,同学说不用蓝白斑筛选,长出来的单菌落大都是连接成功的,

一般基因连接T载体的话可以用5 ul的连接产物加到100 ul甚至50 ul的感受态细胞中,如果是基因连接其他表达载体最好用10 ul吧.效率主要看连接的效率和感受态细胞的效率.实际操作中,会将长出来的菌落挑5个进行菌落PCR,已经鉴定阳性菌落.

如果10微升质粒DNA溶液,加入1/5体积的上样缓冲液,那上样缓冲液是加入多少体积?是2.5微升么? 为什么用2微升的移液器点样时枪头会有残留什么是25微升PCR反应体系? 菌液直接PCR我的pcr体系是50微升的,预变性时间5分钟,模板7微升,我接种单菌落到增菌液,以往都是煮沸了制模板然后p PCR反应体系中dNTP的浓度怎么算?我的反应总体积20微升,其中加1.0微升dNTP,装有dNTP管上写的10mM,1 质粒和目的基因片段分别双酶切（bamh1,xba1）连接后电转感受态细胞,同时将质粒酶切回收的片段转化做对照如何用环氧树脂在导电玻璃上制作一个能装300微升溶液的池子?不用环氧树脂用其他也可? 酶切成功,连接不成功,导入感受态, mtDNA进行pcr扩增 25微升体系的电泳结果全部都出想要的一条亮带但是做了50微升体系的之后跑电泳许多不出条带大肠杆菌感受态细胞转化实验中没冰浴就热击会怎样? 质粒与目的基因的连接产物是? 25微升PCR体系中,两种引物分别加0.5微升,那么所添加的引物的浓度是多少?几摩尔每升?