生化实验:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离混合蛋白质,天然胶与变性胶原理和应用的不同点?

来源：学生作业帮编辑：灵鹊做题网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/29 12:03:38

最大的区别就在于蛋白在电泳过程中和电泳后会不会变性.
1,凝胶的配置中非变性凝胶不能加入SDS,而变性凝胶的有SDS.
2.电泳载样缓冲液中非变性凝胶的不仅没有SDS,也没有巯基乙醇.
3.在非变性凝胶中蛋白质的分离取决于它所带的电荷以及分子大小,不像SDS-PAGE电泳中蛋白质分离只与其分子量有关.
4.非变性凝胶电泳中,酸性蛋白和碱性蛋白的分离是完全不同的,不像SDS-PAGE中所有蛋白都朝正极泳动.非变性凝胶电泳中碱性蛋白通常是在微酸性环境下进行,蛋白带正电荷,需要将阴极和阳极倒置才可以电泳.
5.因为是非变性凝胶电泳,所有的电泳时候电流不能太大,以免电泳时产生的热量太多导致蛋白变性,而且步骤都要在0-4度的条件下进行,这样才可以保持蛋白质的活性,也可以降低蛋白质的水解作用.这点跟变性电泳也不一样.

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