western blot结果条带如何拼接
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/03 17:13:12
如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件:1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列;2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有
产检医院没有给你结论和指导吗?再问:再做脐静脉穿刺.11和6代表什么?谢谢再答:11和6是计数,再问:什么数?再答:就是检测了17个核型,其中11个是,,,6个是,,,
你的电泳缓冲液和制胶缓冲液浓度不准或者脏了吧?换新的电泳缓冲液和制胶缓冲液试试.marker都出问题说明是你的胶的问题,或者电泳操作的问题.
1.先看下PCR电泳图里杂带多不多,若有的话很可能非特异性扩增了2.若条带干净,仍然有可能存在非特异性扩增,引物特异性不高导致竞争结合可将DNA直接酶切看是否能切出你的目标片段3.序列比对结果不能只看
一开始的时候是叫Southernblot的,后来又出现了两个过程相似但对象不同的印迹方法,一个针对RNA,一个针对蛋白质,这两种技术分别被称为Northern和Western,才最终确定下来叫West
一个可能原因,DNA结合了蛋白质,所以跑不出去.加loadingbuffer后加热(90度以上)一下再上样试试.另外一个原因,你的产物特别大(不一定是目标产物)再问:我做的是菌落PCR电泳检测结果,我
可以继续.只需补充加入内切酶便可.因为你的buffer没有消耗,而BSA本身只是为了保护酶活性的杂蛋白,没有特别功能,量的多少本来关系也不很大.同行,好运!
WB的胶用考马斯亮蓝染色,有为了确定你的目的条带电泳情况目的,还有一个目的,就是跟用丽春红染摸一样的作用,看转膜的效率.也就是看你的目的条带是否都转移到你的膜上了.这步染色完全可以省略,一般都可以用预
ItseemsthatyoudohaveDNAinyourmiddlelane(高盐低pH法?),buttheamountismuchlessthatothers.ODreadingonlyindic
利用样本目的蛋白的光密度比内参照基因条带的光密度,比较不同样本的相对表达率.
首先试剂应该没有问题,现在连作为marker的基因都扩不好,那么一个是你的引物有问题,另一个就是反转录出问题了.遇到这样的问题应该一步一步的排除.首先确定反转录没有问题,一般的鉴定办法是扩增marke
酶切位点消失啦,测个序看看.再问:测序了,说我的链接质粒没有信号再答:重新做吧,多半不对!
PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来的东西跑个胶看一看.如果抽出来了,但是PCR没跑出来,就把模板浓度降低一下;如果DNA没跑出来,就要从抽提步骤上找问题.你们用
试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来再问:我提出来的DNA杂质太多,PCR过后电泳,拖尾现象严
非特异性扩增.建议试试:1提高退火温度,或加点DMSO2重新设计引物3做分段PCR,再连起来4全基因组合成
区分你的模板里面是否有基因组污染的方法:在做逆转录反应的同时,做一个阴性对照,其他所有都和实验组相同,除了不加入逆转录酶.得到RT-PCR产物后跑胶,如果该阴性对照里也扩增出来明显条带的话,你的模板就
条带的宽度代表含量的多少,越宽含量越多.条带的高低代表溶解度的大小,条带的位置越高,说明溶解度越大,随层析液扩散的越快.
按照老师教你的步骤严格执行.要遵循一个道理,就是样品上样量,一抗,二抗浓度都要仔细认真的反复摸索,找出最合适的用量,要大胆地去尝试不同的实验条件,然后细心地总结.每换一个检测对象——蛋白或者抗体做we
转膜有问题吗?转膜时那些条带有气泡产生吗?请问你做了这些样品对应的actin内参了吗?丽春红染色显示的条带怎样?若内参没问题,是不是你加底物没有弄均匀?你的一抗和二抗什么条件?
首先怀疑,特异性不好,解决办法:1,可能是模板量过高,降低模板浓度10-1000倍;2,适当提高退火温度1-3度,或者先用高于你以往退火温度的1-3度先p上5个循环,再用先前温度p剩余的循环(也就是在