pcr反应体系15ul

标准的PCR反应体系：10×扩增缓冲液10ul4种dNTP混合物各200umol/L引物各10～100pmol模板DNA0.2ugTaqDNA聚合酶2.5uMg2+1.5mmol/L加双或三蒸水至10

PCR-RFLP是聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性分析的简称.是在PCR和DNA序列分析基础上产生的RFLP技术.该方法是通过PCR扩增一段DNA片段,然后再选择适当的限制性内切酶,消化PCR

在做QRT-PCR时,一定要有内参,即在PCR时,每个标本都要做对应的内参,而且每次都是看家基因,一般用bate-actin,有时也用GAPDH.内参的选择：普通PCR内参的大小没有多大要求,但rea

模板1-100ng引物1（10uM）0.1-0.5uM引物2（10uM）0.1-0.5uMdNTP(10mM)1mM聚合酶5-10U聚合酶缓冲液(10*)10倍稀释水补足所需体积

楼上说的挺有道理,一般pcr反应体系的大小根据扩增的目的来确定,如果扩增后的产物还要用于后续的实验的话就要加大反应体系,50ul或者小体系25多做几管；如果仅仅是为了检测目的条带的话就可以做小体系的如

dNTP混合物：提供DNA结构的基础元件,像房子的砖瓦；引物：DNA聚合酶无法从无到有合成DNA,需要一个3‘羟基,引物就是这个作用；TaqDNA聚合酶：DNA聚合酶的一种,耐高温,保持高活性,使得P

第一：你这个胶跑的时间太久了!第二：你这个模板加的太多了!第三：你这个酶加的太多!第四：你的模板可能纯度不高如果以上问题都解决了还是没有改变,你可以考虑重新设计合成引物了再问：谢谢您，我排除时间一下时

根据各试剂的终浓度来确定自己添加量,至于究竟应该用多大的体系我认为要根据自己的情况来确定,常用的有20,25,50等体系.建议参考别人的文献,一般做基因克隆的文章都会写反应体系,每种试剂用量.

模板,引物,聚合酶,原料加温度循环的条件

博凌科为-为你loadingbuffer的作用不仅仅是有染色,loadingbuffer的成分往往还有甘油或者蔗糖这是最关键的一点是要将你的样的密度加大,只有加大密度才能在你点样的时候,使得你的样品比

我帮你BS一楼.问反应体系,他给黏贴PCR的概念.PCR反应体系,简单的说,就是PCR管子里所有东西的混合溶液,就是溶解有引物、模板DNA、游离碱基、Taq酶、甘油等等的水溶液.

首先要看你的条带是否清晰,虽然亮度不够但是清晰度应该高,没有拖尾没有非特异条带和引物二聚体,如果以上都没有,仅仅是目标条带不够亮的话,我觉得你可以将25微升体积同比放大至50微升反应体系,相应的制胶的

PCR体系就是指一定比例的PCR要素（水、引物、酶、镁、dNTP、模板）的混合物.常用的体系有10微升、20微升、25微升、50微升等.通常小体系用于检测、分析,而大体系用于回收PCR产物.但是要注意

这个比较简单,其实你买Taq中就有反应体系,其实这个体系都是公司的人大量实验做出来的,我们实验室现在用Takra的Taq酶,体系就按说明书加的,不过体系是50ul的,我们把所有都减半做了25ul体系就

从两条引物Tm看,退火温度大致在52~57℃左右.在这个范围内做下温度梯度.标准PCR体系就可以.ps：引物有些偏长.

典型程序：94℃,5min;(94℃,30s；55℃,30s；72℃,1min)x30；72℃,5min.典型体系：10Xbuffer（含Mg2+）,5ul；2.5mMdNTP,2ul；10uMpri

如果你的实验室对pcr反应体系已摸索很清楚,就不用换反应体系,没有扩出dna可能跟你的操作有关,你可以做个阳性对照,就可以知道是否是体系的问题,一般实验条件体系摸索的很清楚的实验室,体系一般不会有问题

10×扩增缓冲液2ul,4种dNTP混合物各200umol/L2ul,引物各10～100pmol0.5ul,模板DNA0.2ug,TaqDNA聚合酶0.2ul,Mg2+1.5mmol/L1.5ul,加

你盖紧了盖子不等于就盖紧了PCR管.可能你用的是国产的PCR管吧.通常国产的质量稍差,本身就是密封不严的.也就是说PCR管口不够严密,盖上PCR管子的盖,也不能完全密封.这样即使你怎么使劲盖,也没有用

拖带啊知道被合成基因的GC值吗?目的基因大小多少?这些都和PCR程序设计有很大的关系的如果你不知道只能进行梯度实验目测你的引物没有问题因为已经出来了dNTP少一点引物多一点