MMP2 rtPCR扩增曲线不正常,溶解曲线正常
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 14:04:20
孔子在回答曾子问何谓“七教”时说:“上敬老,则下益孝;上尊齿,则下益悌;上乐施,则下益宽;上尊贤,则下择友;上好德,则下不隐;上恶贪,则下耻争;上廉让,则下耻节;此之谓七教.七教者,治民之本也.政教定
你这个情况不需要知道拷贝数目.把样品等比例稀释,比如1:4,或者1:10.至少做4-5个点.PCR后按照相对浓度和扩增的Ct值做曲线,就可以得到扩增效率了.如果要知道拷贝数目,必须有已知浓度的含有该序
我建议你再另外设计几对引物.效率低,最常见的原因就是引物不是很好.
要有梯度浓度,然后以各梯度的扩增结果做标准曲线.这个资料网上很多
是实时定量吗?相对定量deltadeltaCt法的话,即比较内参与目的基因扩增效率是否相同,用Ct值为纵轴,模板cDNA稀释倍数为横轴做拟合曲线,比较目的与内参这两条拟合曲线之间R平方值是否符合要求(
指人用心不忠厚,不正派.【出自】:明·罗贯中《三国演义》第十九回:“宫日:‘汝心术不正,我故弃汝!’”【语法】:主谓式;作谓语、定语;含贬义
你好,这个要在开始的时候选择“相对定量”模式,软件才会给出扩增效率
解题思路:利用导数计算解题过程:varSWOC={};SWOC.tip=false;try{SWOCX2.OpenFile("http://dayi.prcedu.com/include/readq.
先看meltcurve,斜率不对可能反应特异性不好,检查是否有非特异产物.如果是特异性问题,调整反应条件或检查引物设计.标准曲线看斜率之前,先要看线性(几个标准点是否在一条直线上),关键指标是决定系数
拿去修理,很可能买到盗版货
调整生料带或者麻之类的薄厚程度,再调整拧正.对有经验的师傅来说应该不是问题.
扩增效率理论上不可能超过2.计算值超过2,可能是因为PCR效率不高或者不稳定,结果线性度差,导致某个区间的数据点计算出来的扩增效率反而大于2.这样的标准曲线如果作图的话,数据点都不在一条直线上.一般都
ROX加多了,终浓度太高?或者模板量,PCR扩增效率低下?
最常见的屈光不正有三种:\x0d 近视眼:看不清远处物体;\x0d 远视眼:看不清近处的物体;\x0d 散光:因角膜(覆盖眼球的一层透明膜)不规则弯曲而引起的影象变形.\x0d 老视眼是第四种
这与胎位有关系,还要注意胎儿宫内发育的问题,到医院找妇产科大夫.
非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一
PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95度时解旋,55度时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至72度左右DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链.由PCR技术制造
Pfu是DNA扩增过程中,保真性最高,出错率最低的高温DNA聚合酶.基因片段用Pfu扩增得到的产物为平末端,直接克隆比较困难.DNAPCR扩增:用Pfu进行高保真PCR扩增,50ul反应体积,一般扩增
可分为长产物片段和短产物片段两部分.短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5'端之间,是需要扩增的特定片段.短产物片段和长产物片段是由于引物所结合的模板不一样而形成的,以一个原始模板为例,在第一个反应
1、调整下体系,不要自己配置反应液,最好用商品的MIX,这样各个组分都是最佳的配比.2、三步法改为两步法,退火延伸设置为一步,大部分的温度为60度,这个只是建议,具体看你买的试剂的说明书,会有具体的说