大肠杆菌选择β-actin内参
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 01:06:32
直接在NCBI里面查找金银花的内参基因,如果没有的话,就找与金银花同种属植物的内参基因.我做过猪的,在NCBI里查不到猪的内参基因,我就用的小鼠的,因为是持家基因,所以在哺乳动物里面表达的差异不大,也
当然不一定,比如说你的目的基因的copynumber高或者PCR的效率高都会使得beta-actin的条带不如目的基因的条带亮
这要看你内参照的意思是什么了,如果是防止假阴结果,比如PCR体系受抑制之类的,如果有内参就知道这个结果是被抑制了还是真阴性结果,这时内参探针设计非常简单,就是将目标探针中间几个点突变一下,内参引物和靶
在这个专利文件里面有全长,引物你自己设计吧
一是大肠杆菌比较常见,二是大肠杆菌具有致病性所以就作为代表了
1,首先需要根据三个目标基因及Actin的序列设计四对引物,引物设计原则同普通PCR引物,网上有很多介绍的,最好其中一个引物是结构基因部分序列+内含子部分序列这种模式.序列长一些25++,退火温度高一
内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但realtime一般选择300bp以下它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.P
要回答这个问题必须看你引物的序列.你贴出来我帮你查一下,你自己也可以BLAST一下.如果在人和鼠的基因中都可以BLAST到,则可以用,否则就不可以.虽然这些HouseKeeper基因的同源性很高,如果
你说的应该是realtimePCR吧,注意RT其实是逆转录reversetranscription的缩写,和realtime一定要分开来.常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(realtime
大肠杆菌多用LB来培养,培养液黄色浑浊,在OD600时有最大吸收,所以选择600nm的波长来测再问:那参比对照呢再答:参比对照当然是空培养基为好,消除黄色培养基的影响,用纯水的话,会测高0.05左右,
我知道和使用过的U6内参基因只有两个:RNU6-1和RNU6-2.前一个就是常见的u6,后一个有时被称为u6b.在我的大鼠RNA样本当中,u6表达量有些太高,u6b的Cq值与我的目标miRNA比较接近
`````````````````````分给我吧,别浪费了
RT-PCR就是将RNA先反转录为cDNA,在将转录得到的cDNA作为模板进行PCR反应扩增目标片段.用于反转录的引物根据实验的具体情况选择随机引物、OligodT及基因特异引物的一种.对于短的不具有
怎么了,大肠埃希氏菌(E.coli)通常称为大肠杆菌,是Escherich在1885年发现的,在相当长的一段时间内,一直被当作正常肠道菌群的组成部分,在以前认为是非致病菌哦.直到20世纪中期,才认识到
这个概念一般是用在定量PCR中.定量PCR是要检测某个基因的表达,降低或者提高,但是当你得出结果以后,你并不知道是它本身的表达降低/提高了,还是你操作过程中造成的误差(比如提RNA时的损失),所以这个
额,楼上……管家基因确实大部分是所有细胞中都要均一表达的,但重要的在于她的稳定表达,在细胞中的表达数量是较为稳定,浮动较小的.管家基因是相对于奢侈基因所说,它不会由于细胞分化而导致差异表达,在细胞中有
肌动蛋白层
做定量PCR中用到的是一段表达量比较稳定的基因一般作为对照就是说您在做RT-PCR事为了去除不同标准本再RNA得产量,质量,以及逆转录效率上可能纯在的差别而获得目标基因特异性表达的真正差异,通常选择内
【摘要】:鉴定了覆盖拟南芥、水稻和杨树3种模式植物全基因组的20个拟南芥、18个水稻、22个杨树ACTIN蛋白基因,对其染色体定位、基因结构、基因复制等进行了综合分析.并在系统进化分析基础上,将ACT