大肠杆菌表达蛋白空间结构
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 16:41:07
首先得到猪蛋白的基因(提取或者合成),然后将这段基因连接到克隆质粒上,筛选阳性克隆,测序正确后,再将这段基因连接到表达载体上(分泌表达或者融合表达载体),测序、酶切验证以后,就可以表达了表达步骤:挑取
先稀释原液(污水,尿液等),按照规定稀释倍数一般由10~1000倍(根据情况选择)再做粪大肠培养(一般在培养皿,条件达不到可用试管培养)最后通过计数菌落数就可以了.如果还需其他,比如分类,那就从较大较
一般程序如下:获得目的基因-准备表达载体-将目的基因插入表达载体中(测序验证)-转化表达宿主菌-诱导靶蛋白的表达-表达蛋白的分析-扩增、纯化、进一步检测.[主要试剂主要试剂]主要试剂1、LB培养基.2
鱼源,这是由基因编码的氨基酸所决定的
变性失活变形一般都是结构改变.水解才是肽链长度改变.毕竟蛋白质二三四级结构改变都是空间形状改变.一级结构才是氨基酸排列顺序.
有很多种方法,以下列举几种:1,蛋白磷酸酶活力检测(kinaseactivityassay)2,利用专一的磷酸根抗体(phospho-specificantibody)3,西方墨点法或蛋白质印渍法(W
你可以把这个基因提取出来连接到载体上,然后转到另一种植物和大肠杆菌里.具体的步骤比较复杂,你可以找本基因工程类的书看一看.
答:蛋白质是在核糖体上合成的,而蛋白质的基本单位是氨基酸,每种氨基酸分子上都携带有三个碱基,核糖体上合成的蛋白质是由氨基酸上的这些碱基与核糖体RNA上的碱基互补配对,最后,通过肽键连接而形成的.因为核
三种都是一类的题目!1、收集目的基因的mRNA(因为没得内含子),然后用各自特异的引物进行RT-PCR扩增目的基因(也就是水通道蛋白基因,猪的生长素基因和植物生长激素的基因)!2、限制酶切载体(比如E
用GST标签把X蛋白结合到层析柱上,血清用这个柱子亲和层析.
只凭分子量是不能确定蛋白种类的,尤其是SDS-page电泳只是单向的,即便是只有一个很细的条带,上MS检测也会出现上百种蛋白.所以要想知道改条带具体的蛋白种类最准确的检测方法是做个质谱来分析一下.双向
1)你应该是没有明白什么是包涵体,简单的说就是翻译的蛋白没有正确折叠而聚集在一起形成的,主要的是疏水作用.实际上就是很多个蛋白分子,这些蛋白并不是交联在一起的,用高浓度的尿素和盐酸胍可以使他们变性,解
跟表达量相关的,具体异源还是同源蛋白无关.因为大肠杆菌的启动子很强,当你诱导表达后表达的大量蛋白无法正确折叠,造成堆积,自然就形成包涵体了.而且大肠杆菌无高尔基体,对蛋白的分选也是很弱的,所以即使是膜
这个提法本身就有问题,应该叫做基因表达和蛋白修饰更好些.基因通过基因表达产生出原始蛋白质原始蛋白质则通过修饰过程产生出成熟蛋白质基因表达和蛋白质修饰其实是很重要的问题.人类和小白鼠的基因相似度高达百分
主动运输的载体蛋白拥有能与被运载物结合的特异的受体结构域,该结构域对被运载物有较强的亲和性,在被运载物结合之后载体蛋白会将被运载物与之固定,利用钠钾泵和ATP的能量改变其空间结构使得结合了被运载物的结
这个只能查文献了,试着到CNKI上检索检索吧.
用质粒和核糖体表达
解题思路:立体几何解题过程:见附件最终答案:略